W przypadku boreliozy w Europie występuje znacznie więcej szczepów Borrelia niż w Ameryce Północnej.
W Europie testy diagnostyczne in vitro podlegają obecnie przepisom rozporządzenia IVDR (rozporządzenie w sprawie wyrobów do diagnostyki in vitro) (rozporządzenie UE nr 746/2017), które wymaga szczegółowych badań i rygorystycznej akredytacji procesu testowania. Ocena zgodności z rozporządzeniem IVDR jest warunkiem koniecznym dla producentów i dystrybutorów do uzyskania certyfikatu wymaganego do wprowadzenia ich produktów na rynek europejski. Metody diagnostyczne zgodne z rozporządzeniem opatrzone są oznaczeniem CE, co gwarantuje, że test spełnia normy wydajności wymagane w Europie. Ma to szczególne znaczenie w przypadku badań na obecność chorób, w przypadku których warunki epidemiologiczne w Europie różnią się od tych panujących w innych regionach geograficznych. Borelioza jest jednym z takich przykładów, ponieważ w Europie występuje znacznie więcej szczepów krętków Borrelia niż w Ameryce Północnej.
W Stanach Zjednoczonych FDA (amerykańska Agencja ds. Żywności i Leków) stosuje równie rygorystyczne przepisy; nie ma jednak automatycznego uznawania między tymi dwoma systemami. W ostatnim czasie na Węgrzech i w całej Europie pojawiło się wiele testów, które są zarejestrowane wyłącznie w amerykańskiej agencji FDA lub zostały opracowane specjalnie dla Stanów Zjednoczonych. W niniejszym podsumowaniu omówiono przydatność tych testów oraz niezbędne środki ostrożności, które należy podjąć.
Walidacja kliniczna jako najwyższy poziom dowodów
Najwyższy poziom dowodów zapewnia tak zwane prospektywne, zaplanowane z wyprzedzeniem badanie kliniczne, w którym metoda badawcza musi być przeprowadzona „na ślepo” (bez wiedzy o przypisaniu badanych do poszczególnych grup), aby ustalić, do której grupy należy każdy z badanych.
Zarówno rozporządzenie IVDR, jak i przepisy amerykańskiej agencji FDA dopuszczają niższe poziomy walidacji, takie jak tzw. testy „analityczne” przeprowadzane na próbkach pobranych wcześniej z biobanku lub przygotowanych w laboratorium. W przypadkach, w których w ogóle sporządza się protokoły badań klinicznych, producenci (sponsorzy) zamieszczają je z wyprzedzeniem na niezależnych stronach internetowych, takich jak clinicaltrials.gov lub clinicaltrialsregister.eu.
W przypadku przeprowadzania badań klinicznych, w tym badań wewnętrznych, są one często publikowane, co może również stanowić część działań marketingowych. Trudno jest zweryfikować jakość takich publikacji, ale w przypadku czasopisma o wysokiej jakości zazwyczaj nie jest ono dostępne w sprzedaży. Należy zauważyć, że licencjonowane laboratorium zarówno w Stanach Zjednoczonych, jak i w Europie może przeprowadzać testy, które nie zostały zatwierdzone przez właściwy organ, co oznacza, że nie posiadają one rejestracji ani FDA, ani UE (CE).
Viramed/Virachip, jedna z najczęściej stosowanych metod serologicznych na Węgrzech
Testy serologiczne dostarczają ważnych informacji na temat odpowiedzi immunologicznej pacjenta. Jednak w przypadku zakażenia boreliozą wyniki zależą w dużej mierze od tego, czy w ogóle rozwinie się odpowiedź immunologiczna i jak będzie ona ulegać wahaniom. Test Virachip działa w oparciu o zautomatyzowany system przeprowadzania i odczytu testów, w którym na mikrochipie znajdują się antygeny biorące udział w reakcji. Zasada działania jest podobna do testu Western blot.
Test został oceniony w badaniu prospektywnym obejmującym 41 próbek dodatnich i 87 ujemnych (łącznie 128) pochodzących ze szczepu Borrelia B31 (amerykańskiego), w ramach prospektywnego badania obejmującego 41 próbek dodatnich i 87 ujemnych (łącznie 128), co nie spełnia najbardziej podstawowych, powszechnie przyjętych wymagań statystycznych. Na żadnej niezależnej stronie internetowej nie ma śladu tego badania klinicznego. Ponadto przeprowadzono również wstępne i post hoc badania analityczne; dane z tych ostatnich opublikowano w czasopiśmie „Journal of Clinical Microbiology” (współczynnik wpływu 2,78) w 2018 roku. Inną wersję testu oceniono na próbkach nieokreślonego pochodzenia (106 dodatnich, 134 ujemnych, łącznie 240), ale w żadnej niezależnej bazie danych nie figuruje żadne prospektywne badanie kliniczne. Wyniki dostarczają prostych informacji typu „dodatni–ujemny–nieokreślony” dotyczących przeciwciał IgM i IgG.
Vibrant Wellness Tickborne Panel
Test ten również opiera się na serologii, a zatem jest testem pośrednim, opartym na odpowiedzi immunologicznej. Test jest przeprowadzany wyłącznie na terenie USA; próbki są pobierane przez lokalnych przedstawicieli i wysyłane do laboratorium. Zgodnie z drobnym drukiem w wynikach panel nie jest zatwierdzony przez amerykańską agencję FDA i nie posiada rejestracji CE. Na żadnej niezależnej stronie internetowej nie ma dowodów na przeprowadzenie prospektywnego badania klinicznego.
Opublikowano wyniki wewnętrznych testów analitycznych, które przeprowadzono przy użyciu 90 próbek dodatnich z biobanku amerykańskiego CDC oraz 142 próbek od zdrowych ochotników. Wyniki opublikowano w czasopiśmie „Scientific Reports” (współczynnik wpływu 1,0). Raport liczy prawie 20 stron i zawiera szczegółowe informacje na temat zakresu reakcji na każdy antygen, a także oceny pozytywne i negatywne zgodnie zarówno z kryteriami amerykańskiego CDC, jak i alternatywną metodą interpretacji.
Oprócz powszechnych szczepów Borrelia test dostarcza również informacji na temat odpowiedzi immunologicznej na koinfekcje występujące w Stanach Zjednoczonych. Panel obejmuje również test PCR oparty na analizie DNA; jednak metoda ta charakteryzuje się na ogół bardzo niską czułością w próbkach krwi, wykrywając zakażenie w mniej niż jednym na dziesięć przypadków.
Z powyższego jasno wynika, że należy zachować szczególną ostrożność przy interpretacji wyników testów opracowanych w USA, które nie zostały zatwierdzone zgodnie z wymogami europejskimi lub nie zostały zatwierdzone na podstawie prospektywnych badań klinicznych.
Źródła:
Opisy zestawów testowych https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30135227/https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7581523/https://www.scimagojr.comVirameda i Vibrant
(C) Fundacja Boreliozy z Lyme
